运用高效液相色谱法测定甜茶叶中甜茶苷含量措施的钻研(一)

时间:2024-05-18 12:06:10 来源:斗方名士网

本文建树一种接管高效液相色谱测定甜茶叶中甜茶苷含量的运用液相研措施。凭证试验服从,高效甜茶苷测定前处置历程中,色谱以30%乙腈溶液为溶剂,法测接管超声方式对于甜茶叶妨碍处置能取患上最佳的定甜的钻甜茶苷提取率。色谱条件:C18柱(250妹妹×4.6妹妹×5µm);行动相:0.05%磷酸溶液-乙腈(68+32);流速:1mL/min;检测波长:210nm;进样量:5µL;柱温:40℃;外标法定量。茶叶茶苷措施在该色谱条件下,中甜甜茶苷浓度为0mg/mL~1.5mg/mL的含量规模内,甜茶苷峰面积(Y)与甜茶苷浓度(X)具备精采的运用液相研线性关连,线性回归方程Y=21.0844X,高效关连系数r=1.0000;加标接管率为96.2%~102.3%;详尽度(RSD)为1.23%。色谱相关试验数据证实,法测该措施快捷重大、定甜的钻一再性好、茶叶茶苷措施精确,中甜适用于甜茶叶中甜茶苷含量的测定。

1引言

甜茶(RubussuavissimusS.Lee)是蔷薇科植物甜叶悬钩子属多年生有刺灌木,广西家养甜茶为多年生纯做作、原生态、无传染常绿木本植物,是广西特有的野沉闷物,主要妨碍在广西梧州、桂林及柳州等地域的。其适宜天生在亚热带天气区及海拔500-1000m的丘陵山地,由于其叶片味甜,故名甜茶。甜茶是一种低热能的做作甜味植物。家养甜茶具备至关高的营养价钱,其中以广西甜茶最为代表,含有极高的甜茶苷以及茶多酚外,还含有18种氨基酸及人体所必需的微量元素等成份,其中甜茶苷是一种二萜葡萄糖低热量甜料,在化学妄想上与甜菊苷类似,它们均由相同的苷元组成,两者的差距仅在甜茶苷中十位碳上少接一份子葡萄糖。甜茶苷的甜度为蔗糖的300倍,而热值仅是蔗糖的5%,属高甜度、低热能的做作甜味物资。甜茶苷能激活人的胰岛素,飞腾血糖,有很好的保健熏染,对于糖尿病患者以及肾病病人有确定的疗效。甜茶叶提取的甜茶苷是甜味植物中口感最佳的甜味剂,因其绿色做作,保健低热而在食物、饮料、冷食废品、调味品、医药工业、美容化装品等种种行业中揭示出精采的经济价钱。

广西甜茶中甜茶苷的含量与其妨碍时期无关,差距妨碍发育阶段叶子中甜茶苷的含量有着清晰的差距,嫩叶中最高,成叶次之,落叶最低;甜茶叶中甜茶苷的含量与季节也无关连,5月尾较高,6月尾开始回升,7月、8月抵达最高,9月尾开始着落,12月尾降到最低值。

甜茶苷作为甜茶中最紧张的功能性成份之一,其含量的测定对于甜茶叶的综合运用颇为关键。

当初国标中尚未针对于甜茶中甜茶苷含量测定的措施,本论文旨在建树高效液相色谱法测定甜茶中甜茶苷含量的实用精确措施,为甜茶苷的开拓运用作出贡献。

2试验部份

2.1仪器及试剂

UltiMate3000高效液相色谱仪:配二极管阵列检测器;合终日平:感量为0.0001g以及0.00001g;KQ-300DB超声波爆发器;离神思:转速≥8000r/min;XHF-D高速散漫器;恒温振荡器;移液枪。

乙腈(色谱纯,赛默飞世尔);无水乙醇、煤油醚(沸点30~60°)、磷酸(合成纯,上海国药化学试剂);试验用水为超纯水。

甜茶叶:甜茶原叶采摘自广西桂林平乐,经干燥后制患上。

2.2尺度溶液的制备

精确称取甜茶苷尺度品20mg,用30%乙腈消融且定容至10mL混匀,配制成2.0mg/mL的尺度蕴藏溶液。用移液器精确罗致0uL、150uL、250uL、500uL、1000uL、1500uL尺度蕴藏液后用30%乙腈溶液稀释至2mL,配制成品质浓度为0mg/mL、0.15mg/mL、0.25mg/mL、0.50mg/mL、1.0mg/mL、1.5mg/mL的尺度系列使命溶液。

2.3甜茶苷样品测定的色谱条件

2.3.1色谱条件

色谱柱:C18柱(柱长250妹妹,内径4.6妹妹,粒径5µm);行动相:0.05%磷酸溶液+乙腈(68+32);流速:1mL/min;进样量:5µL;柱温:40℃。

2.3.2检测波长的判断

选取甜茶苷尺度溶液进样,在2.3.1的色谱条件下,运用高效液相色谱仪的二极管阵列全波长紫外扫描功能扫描。

2.4色谱出峰评估

按2.3判断的色谱条件,对于甜茶苷含量为0.15mg/mL、0.50mg/mL、1.50mg/mL的尺度点(曲线最低浓度点、中间浓度点以及最高浓度点)进样合成,患上到液相色谱图。

2.5甜茶苷测定前处置提取历程的钻研

将甜茶叶经破碎捣毁后备用。

2.5.1差距溶剂对于提取对于甜茶苷含量测定的影响

选取三个甜茶叶样品(称样量约为0.5g),分说选取70%乙醇、纯水以及30%乙腈作为提取溶剂,提取溶剂用量为10mL,超声提取30min,将提取液用提取溶剂定容至25mL,过滤,测定甜茶苷含量。

2.5.2差距提取方式对于甜茶苷含量测定的影响

选取三个甜茶叶样品(称样量约为0.5g),按表1的四种方式妨碍提取,将提取液用30%乙腈定容至25mL,过滤,测定甜茶苷含量。

表1

2.6加标接管试验

称取四份统一甜茶叶样品,其中一份作为本底,此外三份分说凭证加标量为0.104g/100g、0.264g/100g、0.427g/100g妨碍加标,而后凭证已经判断的甜茶苷测定措施妨碍测定,合计其接管率。

2.7详尽度试验

在判断的甜茶苷含量测定条件下,对于统一甜茶叶样品妨碍6次一再测定。运用6次测定服从的RSD对于详尽度妨碍评估。

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相关链接:甜茶苷胰岛素乙腈溶液

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